Indonesia memiliki kekayaan laut yang sangat besar, termasuk mikroorganisme yang berpotensi untuk berbagai aplikasi industri, mikroorganisme sering dipilih sebagai sumber untuk memperoleh hasil metabolisme, khususnya enzim. Salah satu enzim yang sering digunakan dalam dunia industri yaitu enzim Lipase. Bakteri SC-02 simbion spons clathria sp dari pulau derawan di laporkan memiliki aktivitas lipolitik. Dengan potensi yang dimiliki akan lebih baik jika mengetahui jenis bakteri tersebut, sehingga arah pengembangannya dapat diketahui. Salah satu cara indentifikasi jenis paling akurat saat ini yaitu identifikasi molekuler berbasis gen 16S rRNA. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi bakteri lipolitik yang diisolasi dari spons Clathria sp. di perairan Pulau Derawan. Penelitian ini terbagi menjadi beberapa tahap yaitu sterilisasi alat dan bahan, pemurnian isolat bakteri, peremajaan bakteri, pengujian aktivitas lipolitik dan identifikasi molekuler (DNA, PCR, BLAST). Hasil penelitian menunjukkan bahwa bakteri SC-02 memiliki aktivitas lipase yang tinggi, ditandai dengan terbentuknya zona bening sebesar 3,85 mm yang tergolong dalam kategori kuat. Proses identifikasi molekuler dilakukan dengan metode Polymerase Chain Reaction (PCR) dan sekuensing DNA, yang menghasilkan urutan nukleotida sepanjang 1.423 basa. Analisis BLAST menunjukkan bahwa bakteri SC-02 memiliki kemiripan 99,79% dengan Lysinibacillus fusiformis. Isolat bakteri SC-02 memiliki potensi sebagai sumber enzim lipolitik yang dapat diaplikasikan dalam berbagai bidang industri, terutama dalam pengolahan limbah minyak dan bioremediasi.

Kata Kunci: Bakteri Lipolitik, Enzim Lipase, Gen 16S rRNA, Lysinibacillus fusiformis

Indonesia has enormous marine wealth, including microorganisms that have the potential for various industrial applications, microorganisms are often chosen as a source to obtain metabolic products, especially enzymes. One enzyme that is often used in the industrial world is the enzyme Lipase. The bacteria SC-02, a symbiont of the Clathria sp sponge from Derawan Island, is reported to have lipolytic activity. With its potential, it would be better to know the type of bacteria, so that the direction of its development can be known. One of the most accurate ways of type identification today is 16S rRNA gene-based molecular identification. The purpose of the research was to identify lipolytic bacteria isolated from Clathria sp. sponge in Derawan Island waters. The research is divided into several stages, namely sterilization of equipment and materials, purification of bacterial isolates, bacterial rejuvenation, lipolytic activity testing and molecular identification (DNA, PCR, BLAST). The results showed that SC-02 bacteria had high lipase activity, characterized by the formation of a clear zone of 3.85 mm which was classified as strong. The molecular identification process was carried out by Polymerase Chain Reaction (PCR) and DNA sequencing methods, which resulted in a nucleotide sequence of 1,423 bases. BLAST analysis showed that bacteria SC-02 had 99.79% similarity with Lysinibacillus fusiformis. Bacterial isolate SC-02 has potential as a source of lipolytic enzymes that can be applied in various industrial fields, especially in waste oil treatment and bioremediation. Keywords: Lipolytic Bacteria, Lipase Enzyme, Gen 16S rRNA, Lysinibacillus fusiformis